光化學(xué)衍生反應(yīng)無(wú)需加熱或長(zhǎng)時(shí)間等待,通常在數(shù)秒至數(shù)十秒內(nèi)完成。例如,柱后衍生模式下,樣品在流動(dòng)過(guò)程中即可完成反應(yīng),縮短分析時(shí)間。此外,光化學(xué)反應(yīng)的速率遠(yuǎn)高于傳統(tǒng)熱化學(xué)或酶催化反應(yīng),尤其適用于高通量分析場(chǎng)景。光化學(xué)衍生器無(wú)需手動(dòng)添加化學(xué)試劑,避免了衍生劑混合不均或劑量誤差的問(wèn)題。例如,在線(xiàn)衍生系統(tǒng)可直接連接色譜柱和檢測(cè)器,實(shí)現(xiàn)全自動(dòng)化流程。同時(shí),設(shè)備維護(hù)簡(jiǎn)單,無(wú)需頻繁清洗管路,降低了操作復(fù)雜度。
光化學(xué)反應(yīng)的選擇性取決于目標(biāo)分子對(duì)特定波長(zhǎng)光的吸收能力。通過(guò)調(diào)整光源波長(zhǎng),可準(zhǔn)確控制僅特定化合物發(fā)生衍生化,避免副反應(yīng)干擾。例如,在復(fù)雜基質(zhì)(如食品或環(huán)境樣品)中,光化學(xué)衍生可選擇性地增強(qiáng)目標(biāo)物信號(hào),同時(shí)抑制背景噪聲。與傳統(tǒng)化學(xué)衍生方法相比,光化學(xué)衍生無(wú)需使用大量有機(jī)溶劑或衍生劑,減少了有害廢物的產(chǎn)生。例如,黃曲霉毒素的分析中,光化學(xué)衍生依賴(lài)光照,無(wú)需任何化學(xué)試劑,既降低了成本,又避免了試劑殘留對(duì)檢測(cè)結(jié)果的干擾。
光化學(xué)衍生器的測(cè)定步驟:
1.準(zhǔn)備工作:
-儀器連接:與液相色譜系統(tǒng)正確連接,一般置于色譜柱和檢測(cè)器之間,確保各部件之間的連接緊密,無(wú)泄漏。
-樣品準(zhǔn)備:根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求,準(zhǔn)備好待測(cè)樣品溶液,并進(jìn)行適當(dāng)?shù)念A(yù)處理,如過(guò)濾、稀釋等,以保證樣品的純度和均勻性。
-設(shè)定參數(shù):根據(jù)待測(cè)物質(zhì)的性質(zhì)和分析要求,設(shè)置相關(guān)參數(shù),如光源波長(zhǎng)、光強(qiáng)、反應(yīng)時(shí)間、流動(dòng)相流速等。
2.開(kāi)啟儀器:按照正確的順序依次開(kāi)啟液相色譜系統(tǒng),等待儀器穩(wěn)定運(yùn)行,使各部件達(dá)到設(shè)定的工作狀態(tài)。
3.進(jìn)樣分析:將處理好的樣品溶液通過(guò)進(jìn)樣器注入液相色譜系統(tǒng),樣品在流動(dòng)相的攜帶下依次經(jīng)過(guò)色譜柱和光化學(xué)衍生器。在光化學(xué)衍生器中,樣品中的化合物在特定波長(zhǎng)的光照射下發(fā)生光化學(xué)反應(yīng),轉(zhuǎn)化為易于檢測(cè)的物質(zhì)。
4.數(shù)據(jù)采集與處理:經(jīng)過(guò)衍生化后的樣品進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè),檢測(cè)器將檢測(cè)到的信號(hào)轉(zhuǎn)換為電信號(hào),并傳輸至數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。根據(jù)檢測(cè)器的類(lèi)型和實(shí)驗(yàn)要求,選擇合適的檢測(cè)模式和數(shù)據(jù)處理方法,對(duì)采集到的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析和處理,得到待測(cè)物質(zhì)的相關(guān)信息,如含量、濃度等。
5.結(jié)束實(shí)驗(yàn):完成所有樣品的分析后,按照正確的順序關(guān)閉液相色譜系統(tǒng)。對(duì)儀器進(jìn)行清洗和維護(hù),如清洗進(jìn)樣器、色譜柱、光化學(xué)衍生器的反應(yīng)池等,以保持儀器的清潔和性能穩(wěn)定。